Obiettivi formativi
L’obiettivo del corso è quello di fornire agli studenti un'approfondita conoscenza teorico-pratica delle metodologie alla base della tecnologia del DNA ricombinante.
Al termine del corso, lo studente dovrebbe essere in grado di:
- capire l'importanza e le finalità del clonaggio genico e conoscere le principali tecniche e gli strumenti necessari per manipolare in vitro ed in vivo le macromolecole biologiche (CONOSCENZA E CAPACITÀ DI COMPRENSIONE).
- Progettare la strategia migliore per effettuare l’inserimento di un frammento di DNA d’interesse in un vettore di clonaggio, definendo le metodologie analitiche necessarie per svolgere in modo corretto l’analisi dei cloni ricombinanti. Essere in grado stilare un rapporto di ricerca per esporre i risultati ottenuti (CAPACITÀ DI APPLICARE CONOSCENZA E COMPRENSIONE).
- Saper valutare quale metodologia sia quella ottimale per eseguire un esperimento di clonaggio genico (AUTONOMIA DI GIUDIZIO).
- Essere in grado di esporre i risultati ottenuti in un esperimento di clonaggio genico in modo chiaro e pertinente (ABILITÀ COMUNICATIVE).
- Essere in grado di comprendere testi di natura tecnica e specialistica, utilizzando fonti in lingua italiana ed in lingua inglese (CAPACITÀ DI APPRENDIMENTO).
Prerequisiti
Sono necessarie conoscenze di biologia generale, microbiologia, biochimica, chimica e una buona conoscenza della lingua inglese.
Contenuti dell'insegnamento
Il corso fornirà informazioni approfondite sulle metodologie e strategie alla base della tecnologia del DNA ricombinante.
Nello specifico durante il corso verranno trattati i seguenti argomenti:
- Le basi del clonaggio genico
- Enzimi utilizzati in ingegneria genetica
- Isolamento e purificazione di DNA genomico e plasmidico
- Elettroforesi di acidi nucleici
- Vettori di clonaggio batterici
- Vettori fagici: lambda e M13
- Sintesi in vitro di DNA (PCR)
- Mutagenesi mediata da PCR
- Vettori di clonaggio eucariotici
- Costruzione ed analisi di librerie genomiche
- Purificazione di RNA messaggero e conversione in cDNA
- Costruzione ed analisi di librerie a cDNA
- Sequenziamento del DNA
Programma esteso
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Bibliografia
- Gene Cloning and DNA Analysis: An Introduction, 8th Edition. Terry A. Brown. Zanichelli
- Dai geni ai genomi. Dale, von Schantz – EdiSES
- Analisi dei geni e genomi. Richard J.Reece – EdiSES
- Ingegneria genetica. Principi e tecniche. S. Primrose et al. Zanichelli
- DNA Ricombinante - J.D.Watson et al. Zanichelli
- Molecular biotechnology : principles and applications of recombinant DNA. Glick, Bernard R.
- Molecular biology: principles of genome function. Oxford university press
Metodi didattici
Il corso è organizzato in:
- lezioni frontali da parte del docente
- esercitazioni pratiche in laboratorio
Modalità verifica apprendimento
La verifica dell'apprendimento si basa su una prova scritta che consiste in tre domande a risposta aperta sui diversi argomenti affrontati durante il corso e due domande con esercizi (sul clonaggio genico e la PCR).
Per poter sostenere l’esame, lo studente deve aver partecipato alle esercitazioni organizzate in laboratorio e preparato una relazione che verrà valutata in sede d'esame dalla commissione.
La relazione sui laboratori e la prova scritta permettono di verificare la capacità di apprendimento dello studente, la sua autonomia di giudizio, la sua capacità di applicare le conoscenze acquisite a problemi pratici di laboratorio e la sua capacità di comunicare quanto è stato appreso utilizzando una corretta terminologia.
Altre informazioni
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